膳食纖維檢測的工作原理和使用時的操作方法

　　膳食纖維檢測是指碳水化合物及其相類似物質的總和，包括多糖、寡糖、木質素以及相關的植物物質。主要有纖維素、半纖維素、果膠及親水膠體物質，如樹膠、海藻多糖等組分；另外還包括植物細胞壁中所含有的木質素；不被人體消化酶所分解的物質，如抗性淀粉、抗性糊精、抗性低聚糖、改性纖維素、黏質、寡糖以及少量相關成分，如蠟紙、角質、軟木脂等。

　　膳食纖維檢測的操作方法

　　1、試樣制備試樣處理根據水分含量、脂肪含量和糖含量進行適當的處理及干燥，并粉碎、混勻過篩。

　　①脂肪含量＜10％的試樣：若試樣水分含量較低(<10%)，取試樣直接反復粉碎，至*過篩。混勻，待用。

　　若試樣水分含量較高(≥10%)，試樣混勻后，稱取適量試樣(mc，不少于50g)，置于(70±1)℃真空干燥箱內干燥至恒重。將干燥后試樣轉至干燥器中，待試樣溫度降到室溫后稱量(MD)。根據干燥前后試樣質量，計算試樣質量損失因子(f)。干燥后試樣反復粉碎至*過篩，置于干燥器中待用。

　　②脂肪含量≥10％的試樣：試樣需經脫脂處理。稱取適量試樣(mc，不少于50g)，置于漏斗中，按每克試樣25mL的比例加入石油醚進行沖洗，連續3次。脫脂后將試樣混勻再進行干燥、稱量(MD)，記錄脫脂、干燥后試樣質量損失因子(f)。試樣反復粉碎至*過篩，置于干燥器中待用。

　　③糖含量≥5％的試樣：試樣需經脫糖處理。稱取適量試樣(mc，不少于50g)，置于漏斗中，按每克試樣10mL的比例加入85％乙醇溶液進行沖洗，棄乙醇溶液，連續3次。脫糖后將試樣置于40℃烘箱內干燥過夜，稱量(MD)，記錄脫糖、干燥后試樣質量損失因子(f)。干燥后試樣反復粉碎至*過篩，置于干燥器中待用。

　　2、酶解準確稱取雙份試樣(m)，約1g(至0.1mg)，雙份試樣質量≤0.005g。將試樣轉置于400～600mL高腳燒杯中，加入0.05mol/LMES-TRIS緩沖液40mL，用磁力攪拌直至試樣*分散在緩沖液中。同時制備兩個空白樣液與試樣液進行同步操作，用于校正試劑對測定的影響。

　　膳食纖維檢測樣品分別用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶進行酶解消化以去除蛋白質和可消化的淀粉。總膳食纖維（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再將沉淀物過濾，將TDF殘渣用乙醇和丙酮沖洗，干燥稱重。不溶性和可溶性膳食纖維（IDF和SDF）是酶解后將IDF過濾，過濾后的殘渣用熱水沖洗，經干燥后稱重。SDF是將上述濾出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再過濾，干燥，稱重。TDF、IDF和SDF量通過蛋白質、灰分含量進行校正。