煙草花葉病毒檢測(cè)樣品的收集、處理及保存方法

　　煙草花葉病毒檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法，屬于植物病毒檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的煙草花葉病毒定量檢測(cè)試劑盒包括如下分裝試劑和酶標(biāo)板：所述酶標(biāo)板為煙草花葉病毒抗體預(yù)包被酶標(biāo)板；所述分裝試劑為：樣品稀釋液，為磷酸鹽緩沖液；洗滌液，含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1～0.5％的Tween?20的磷酸鹽緩沖液；反應(yīng)終止液，濃度為1.8～2.2mol/L的H2SO4溶液；酶標(biāo)抗體工作液，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的濃度為2μg/ml的特異性鼠抗煙草花葉病毒單克隆抗體；顯色劑；煙草花葉病毒標(biāo)準(zhǔn)品。本發(fā)明的試劑盒能夠?qū)崿F(xiàn)煙草花葉病毒的定量檢測(cè)，且快速、準(zhǔn)確度高、靈敏度高

　　煙草花葉病毒檢測(cè)試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被煙草花葉病毒（TMV）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、樣本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的煙草花葉病毒（TMV）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），判斷樣品是否含有煙草花葉病毒（TMV）。

　　煙草花葉病毒檢測(cè)樣品的收集、處理及保存方法

　　1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

　　2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

　　3.細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

　　5.保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)

　　以上便是今天關(guān)于煙草花葉病毒檢測(cè)樣品的收集、處理及保存方法的全部分享了，希望對(duì)大家今后使用本設(shè)備能有幫助。